结构推理 简述基因重组主要步骤。
【正确答案】基因重组主要步骤包括 1)获得目的基因:目的基因指与重组DNA工作的最终目的相关的基因,包括基因组DNA和反转录合成的双链cDNA两大类,常通过人工合成、基因组DNA分离、cDNA文库筛选及聚合酶链反应等方法获取。 2)在体外将目的基因与适宜的载体DNA连接形成重组体,该重组体有自我复制的能力。 3)通过转化或转染等方法将重组DNA引入宿主细胞。 4)从中筛选出成功转化带有重组体的阳性细胞克隆。 5)重组蛋白质在宿主细胞的表达(即目的基因的表达)。
【答案解析】