问答题 如何利用T4 DNA聚合酶制备平末端?
【正确答案】可用T4 DNA聚合酶将任何形式的双链DNA转变成平末端的双链DNA。虽然Klenow酶能够进行这种反应,但是T4 DNA聚合酶是更好的选择,因为T4 DNA聚合酶的3'→5'外切核酸酶的活性比Klenow酶强得多,并且在高浓度的dNTP存在时,降解作用即会停止。根据这样一种特性,可以调整反应条件,用T4 DNA聚合酶的3'→5'外切核酸酶的活性将具有3'突出端的双链DNA切成平末端;用T4 DNA剩合酶的5'→3'合成酶的活性将具有5'突出端的双链DNA填补成具有平末端的双链DNA。
【答案解析】