【正确答案】蛋白质的分离纯化是根据蛋白质在溶液中的性质、分子大小、溶解度、电荷、吸附性质和对配体分子的生物学亲和力等确定的。蛋白质分离纯化的方法主要有： (1)根据溶解度不同的分离方法 ①盐析：在蛋白质溶液中加入大量中性盐，以破坏蛋白质的胶体性质，使蛋白质从溶液中沉淀析出的方法。常用的中性盐有：硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等。盐析时，溶液的pH在蛋白质的等电点处效果最好。 ②等电点沉淀：沉淀出来的蛋白质保持天然构象，能重新溶解于适当的pH和一定浓度的盐溶液中。 ③有机溶剂分级分离：凡能与水以任意比例混合的有机溶剂，如乙醇、甲醇、丙酮等，均可引起蛋白质沉淀。 ④温度影响蛋白质溶解。 (2)根据电荷不同的分离方法 ①电泳：蛋白质分子在高于或低于其pI的溶液中带净负电荷或净正电荷，因此在电场中可以移动。电泳迁移率的大小主要取决于蛋白质分子所带电荷量以及分子大小。 ②离子交换层析：一种用离子交换树脂作支持剂的层析法。 (3)根据相对分子质量不同的分析方法 ①透析和超滤：透析是利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法；超滤法是应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜，达到浓缩蛋白质溶液的目的。 ②密度梯度(区带)离心：利用物质密度的不同，经超速离心后，分布于不同的液层而分离。超速离心也可用来测定蛋白质的分子量，蛋白质的分子量与其沉降系数(S)成正比。 ③凝胶过滤：又称分子筛层析，是一种柱层析。 (4)根据对配体的特异生物学亲和力不同的分离方法 亲和层析法：将具有特殊结构的亲和分子制成固相吸附剂放置在层析柱中，当要被分离的蛋白混合液通过层析柱时，与吸附剂具有亲和能力的蛋白质就会被吸附而滞留在层析柱中；那些没有亲和力的蛋白质由于不被吸附，直接流出，从而与被分离的蛋白质分开。选用适当的洗脱液，改变结合条件可以将被结合的蛋白质洗脱下来。