问答题
焦磷酸酶可以催化焦磷酸水解成磷酸,它的相对分子质量为120000,由6个相同的亚基组成,纯酶的Vmax为3600U/mg酶,它的一个酶活力单位(U)规定为:在标准的测定条件下,37℃,15min内水解10μmol焦磷酸所需要的酶量。问:①每毫克酶在每秒钟内水解了多少摩尔底物。②每毫克酶中有多少摩尔的活性中心?(假设每个亚基上有一个活性中心)。③酶的转换数是多少?
【正确答案】①每个单位为10μmol,15min内1mg酶催化焦磷酸水解速度为
(3600×10μmol)/15min=2400(μmol/min)
=2400μmol/60s
=40μmol/S
=4×10-5(mol/S)
②每毫克酶中有酶分子的摩尔数为
0.001g/120000(酶相对分子质量)=8.33×10-9mol
=8.33nmol
由于每个酶分子含有6个亚基(6个活性中心),所以每毫克酶中含有活性中心的活性中心摩尔数为
8.33×10-9mol×6=5×10-8mol
③酶的转换数指“分子活力”或“摩尔活力”,即在最适条件下每摩尔酶每分钟转换的底物摩尔数。对于多亚基(多活性中心)酶则为每摩尔活性中心在最适条件下每分钟转换底物的摩尔数,即:
Kcat=2400×10-6/(5×10-8)=48000(min-1)
【答案解析】