问答题
如何利用T4 DNA聚合酶制备3'隐含末端或双链平末端?
【正确答案】
T4 DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶和3'→5'外切核酸酶两种活性。在无dNTP时,该酶只有3'→5'外切核酸酶活性;如果只有一种dNTP(如只有dATP),链的3'端的降解则到出现该碱基A为止。这可使降解反应得到控制,产生一定长度的3'隐含末端;当有四种dNTP(且浓度较高)时,则产生3'平末端的DNA。无论是降解还是合成反应,都是两侧同时进行。
【答案解析】
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