问答题 简述E.coli的插入序列的特点,并分析其对自发性突变的重要性。
【正确答案】插入序列是可以转座的遗传元件,它们只插入自我复制的DNA中,如细菌和噬菌体的染色体及质粒。E.coli中,有几种不同的IS元件,长度都是0.7~1.5kb。每种都有特定核苷酸序列,有的编码转座酶,负责启动特定IS的转座。一般来说,每个IS的两端都有一对短的反向重复,长约9~24bp(如图所示),转座酶似乎就是通过识别这些反向重复序列起始转座的;也就是说,特异的转座酶和反向重复序列对转座都很重要。转座的另一个性质是每个IS的两端都与宿主DNA上的靶位点,在转座过程中该位点被复制。转座时,IS向基因组中新的位置随机的移动。通常,它插入一个结构基因产生突变表型,有时是因为编码序列受到阻断,有时则因为IS元件含有多种转录或翻译的终信号。另外,IS可插入操纵子的操纵基因一启动子区域,导致整个操纵子被关闭,但偶尔操纵子的表达也会变为组成型。当IS含有一个正确的定向的启动子时,可以转录细菌操纵子。因为这个启动子不受调节细菌操纵子的正常调控蛋白调控,产生的效果类似于操纵基因组成型突变。所以,IS元件的转座是自发突变的一个重要来源。必须意识到这些突变不能被碱基类似物或移码突变诱变剂诱导和回复。E.coli中有几种不同的IS元件,拷贝数在1~5。
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【答案解析】