【正确答案】酶活力是指酶催化一定化学反应的能力,通过测定催化反应速度可了解酶活力。
测定酶活力时应坚持如下3个基本原则:
(1)测定酶促反应初速度。
在酶促反应初期,产物浓度随反应进程呈正比例增加,此时的反应速度为初速度v0;随着时间的延长,反应速度逐步下降;到一定反应时间后,产物浓度不再增加。其原因有3个:①产物浓度的增加使逆反应速度增加;②产物对酶的抑制作用;③部分酶分子失活。要准确测定一种酶的催化活力,应测定产物浓度随反应时间呈线性增加时间段的速度(v0)。只有v0能反应酶的真实催化能力。
(2)在最适条件下测定酶促反应速度。
pH不仅影响酶分子的解离状态和稳定性,而且还影响底物的解离状态;酶的本质一般是蛋白质,过酸、过碱能使酶变性。因此要选择在最适pH下进行酶促反应。一个反应的速度虽然可以在一定范围内随温度升高而加快,但温度过高会导致酶蛋白变性,因此应在最适温度下进行。此外,溶液中的离子种类和离子强度对酶活性和酶的溶解度都有一定影响,应该选择合适的反应缓冲液。
(3)底物浓度远超过酶量。酶反应速度很高,要准确测定酶活力,必须提供足量的底物,使所有酶处于饱和状态。
【答案解析】