【正确答案】多数情况下，测序是对已知序列的次级克隆进行鉴定和证实(即确证性测序)，如次级克隆DNA的插入方向、定点突变的检测、删切产物的鉴定和待表达基因阅读框架的调整等。这类DNA片段通常较小，只需了解两端的部分序列即可。所以只需直接克隆到M13mp或者质粒载体中，进行单链或双链模板测序。对于一个稍大的DNA片段的确证性测序，可以从两端开始双向测序，再通过中间重叠部分拼出全序列。对于更大的DNA序列，可以在序列适当区段增加一个或数个测序引物，分别测序再拼出全序列。