结构推理 如何测定呼吸链组分在内膜的分布位置?
【正确答案】用完整的线粒体很难达到这一研究目的,一般用超声波处理使外膜破碎,使内膜产生许多亚线粒体小泡,这样就可用专一性的抗体对呼吸链组分进行定位、定量的研究。如用cytC抗体处理时,可抑制完整线粒体的氧化磷酸化,但不能抑制亚线粒体的氧化磷酸化,说明cytC靠近内膜的外侧(膜间隙),也可以用不能通透内膜的标记物如35S-DABS(重氮苯磺酸)与线粒体和亚线粒体的作用测定掺入量并与分离状态的呼吸链组分进行比较进行间接定位。如35S-DABS掺入完整线粒体的cytC数值接近分离状态,而掺入亚线粒体的cytC的数值则很低,说明cytC位于内膜的外侧。
【答案解析】