【正确答案】Ⅰ类限制性核酸内切酶、Ⅱ类限制性核酸内切酶和Ⅲ类限制性核酸内切酶3类。Ⅱ类限制性核酸内切酶最适合基因工程,因为Ⅱ类限制性核酸内切酶只由一条肽链构成,仅需Mg2+,切割DNA特异性最强,且就在识别位点范围内切断DNA。Ⅰ类和Ⅲ类限制性核酸内切酶由于切割序列是随机的,与识别序列不统一,因此在基因工程中没有什么价值。
【答案解析】[考点]限制性内切酶的类型及特点。按限制酶的组成、与修饰酶活性关系,切断核酸的情况不同,分为三类:
Ⅰ类限制性核酸内切酶由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列,通常在识别位点周围400~700bp。这类酶的作用需要Mg2+,S腺苷甲硫氨酸及ATP。
Ⅲ类限制性核酸内切酶与Ⅰ类酶相似,是多亚蛋白质,既有内切酶活性,又有修饰酶活性,切断位点在识别序列周围25~30bp范围内,酶促反应除Mg2+外,也需要ATP供给能量。
Ⅱ类限制性核酸内切酶只由一条肽链构成,仅需Mg2+,切割DNA特异性最强,且就在识别位点范围内切断DNA。是分子生物学中应用最广的限制性内切酶。通常在重组DNA技术提到的限制性核酸内切酶主要指Ⅱ类酶而言。