【正确答案】(1)大肠杆菌乳糖操纵子的模型 ①结构基因:大肠杆菌乳糖操纵子含有Z、Y、A三个结构基因。 a.lacZ:编码β-半乳糖苷酶,将乳糖水解为半乳糖和葡萄糖。 b.lacY:编码β-半乳糖苷透过酶,负责将乳糖由胞外运送到胞内,穿过细胞壁和原生质膜进入细胞内。 C.lacA:编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶,催化乙酰-CoA的乙酰基转移到半乳糖苷上,形成乙酰半乳糖。 ②调节基因I:I基因编码的阻遏蛋白可以与操纵区O结合,使lac基因的转录起始受到抑制。 ③操纵区O:操纵区是DNA上的一小段序列(仅为26bp),是阻遏蛋白的结合位点。 ④启动子P:可以与RNA聚合酶结合。 ⑤CAP位点:可以与cAMP-CRP复合物结合。CRP是cAMP的受体蛋白,二者结合后形成复合物可以结合在启动子上游的CAP位点,促进结构基因的转录。 (2)乳糖操纵子的调控模式 转录时,RNA聚合酶首先与启动子(P)结合,通过操纵区(O)向右转录。转录从O区中间开始,按Z→Y→A方向进行,每次转录出来的一条mRNA上都带有这三个基因。转录的调控在启动区和操纵区进行。 ①阻遏蛋白的负性调节 lacZ、lacy、lacA为结构基因,逆流而上依次是操纵区、启动子和调节基因。 a.当细胞内无诱导物存在时,阻遏蛋白与操纵区结合,由于操纵区与启动子有一定的重叠,因此妨碍了RNA聚合酶在与启动子形成开放性启动子复合物,不能启动结构基因的转录。 b.当加入乳糖后,乳糖被异构化形成异构乳糖,与阻遏蛋白结合,改变阻遏蛋白的构象,使之从操纵区上解离下来。RNA聚合酶与启动子结合,形成开放性启动子复合物,从而开始转录lacZ、lacY、lacA结构基因。乳糖操纵子的这种调控机制称为可诱导的负调控。 ②cAMP-CRP的正性调节 在启动子上游有CAP结合位点,当大肠杆菌从以葡萄糖为碳源的环境转变为以乳糖为碳源的环境时,cAMP浓度升高,与CRP结合,使CRP发生变构,形成cAMP-CRP复合物,cAMP-CRP复合物结合于乳糖操纵子启动序列中的CAP位点,激活RNA聚合酶活性,促进结构基因转录,对乳糖操纵子实行正调控,促进合成分解乳糖的三种酶。 ③协同调节 当阻遏蛋白封闭转录时,cAMP-CRP对该系统不能发挥作用;如无cAMP-CRP存在,即使没有阻遏蛋白与操纵区结合,操纵子仍无转录活性,即cAMP-CRP复合物与启动子区的结合是转录起始所必需的。具体存在以下4种不同的组合状态,决定基因的表达与否,以适应环境中葡萄糖和乳糖的有无状态,即在有葡萄糖时,先利用葡萄糖,用完后,再利用乳糖作为能源。 a.葡萄糖和乳糖都不存在:cAMP-CRP可发挥作用;但无乳糖的诱导,阻遏蛋白与DNA结合,基因关闭。 b.葡萄糖存在、乳糖不存在:有葡萄糖存在,cAMP-CRP不起作用;无乳糖存在,阻遏蛋白与DNA结合,基因关闭。 C.葡萄糖和乳糖都存在:阻遏蛋白与DNA解离,但由于有葡萄糖存在,cAMP-CRP不起作用,基因仍然关闭。 d.葡萄糖不存在、乳糖存在:阻遏蛋白与DNA解离,无葡萄糖存在,cAMP-CRP起协同作用,基因转录启动。
【答案解析】