结构推理 当载体和外源基因是平齐末端时(或者二者具有不同的粘性末端时),怎样实现载体与外源基因的重组?(至少列举3种方法)
【正确答案】(1)平端连接。此时,DNA连接酶可以催化相同或不同限制性内切酶切割的平端之间的连接。需要时也可将粘性末端经特殊酶处理后,使单链突出端被补平或削平,变为平端后再行连接。
   (2)同聚物加尾连接。利用多聚A或多聚T之间的退火来完成连接。首先在末端转移酶的作用下,在DNA片段末端加上同聚物序列、制造出粘性末端,然后进行连接。这种连接方式也可以看成为一种特殊的粘性末端连接形式。
   (3)人工接头连接。又称连接子,是指含有某些限制酶切点的寡核苷酸片段,在T4DNA连接酶的作用下,将接头连接到目的DNA片段的两端,然后再用相应的限制酶切割,使外源DNA片段的两端具有了粘性末端,可以与相应的载体进行连接。
【答案解析】[考点]外源基因与载体的连接方式。外源基因与载体的连接方式有:粘性末端连接、平端连接、同聚物加尾连接、人工接头连接等多种连接方式。