（1）常用的菌种保藏方法包括：

①传代培养保藏：传代培养保藏又称悬液保藏法。由于传代培养与培养物的直接使用密切相关，所以传代培养保藏是进行微生物保藏的基本方法。

②冷冻保藏：冷冻保藏是指将微生物处于冷冻状态，使其代谢作用停止，从而达到保藏的目的。

③干燥保藏法：因为水分对各种生化反应和一切生命活动至关重要，因此，干燥，尤其是深度干燥是微生物保藏技术中另一项经常采用的手段。

（2）各自的原理和优缺点

①传代培养保藏

a．原理：通过降低被保藏微生物的代谢水平或防止培养基于燥，可延长传代保藏的保存时间。

b．优点：操作简单，经济实用。

c．缺点：菌种进行长期传代十分繁琐，容易污染，特别是会由于菌株的自发突变而导致菌种衰退，使菌株的形态、生理特性、代谢物的产量等发生变化。因此在一般情况下，在实验室里除了采用传代法对常用的菌种进行保存外，还必须根据条件采用其他方法，特别是对那些需要长期保存的菌种更是如此。

②冷冻保藏

a．原理：将微生物处于冷冻状态，使其代谢作用停止，以达到保藏的目的。

b．优点：适用的微生物范围更广，使用更普遍。

c．缺点：体积大的细胞和无细胞壁的细胞对低温更敏感，其原因是低温会使细胞内的水分形成冰晶，从而引起细胞，尤其是细胞膜的损伤。

③干燥保藏法

a．原理：主要包括沙土管保存和冷冻真空保藏两项微生物干燥保藏技术。

沙土管保存：一般将菌种接种斜面，培养至长出大量的孢子后，洗下孢子制备孢子悬液，加入无菌的沙土管中，减压干燥，直至将水分抽干，最后用石蜡、胶塞等封闭管口，置冰箱保存。

冷冻真空保藏：将加有保护剂的细胞样品预先冷冻，使其冻结，然后在真空下通过冰的升华作用除去水分。使其可在真空或惰性气体的密闭环境中置低温保存，从而使微生物处于干燥、缺氧及低温的状态进行休眠，可以达到长期保藏的目的。

b．优点：沙土管保存主要适用于产孢子的微生物，如芽孢杆菌、放线菌等。此法简便易行，并可以将微生物保藏较长时间，适合一般实验室及以放线菌等为菌种的发酵工厂采用。

冷冻真空保藏用冰升华的方式除去水分，手段比较温和，细胞受损伤的程度相对较小，存活率及保藏效果均不错，而且经抽真空封闭的菌种安瓿管的保存、邮寄、使用均很方便。因此冷冻真空干燥保藏是目前使用最普遍、最重要的微生物保藏方法，大多数专业的菌种保藏机构均采用此法作为主要的微生物保存手段。

c．缺点：设备较贵，操作麻烦，较适用于专业保藏。