结构推理 M13噬菌体载体与噬菌质粒有何不同?
【正确答案】M13噬菌体载体是基于大肠杆菌M13丝状噬菌体基因组构建的载体,在M13噬菌体基因组基因间隔区中插入β-半乳糖苷酶N端一小段编码序列(内插入若干限制性内切酶的单一切点)及其调控序列。M13载体一般只能克隆300~400bp的外源DNA片段,常用于制备单链DNA探针、定位诱变模板,也可用于噬菌体展示。噬菌质粒是噬菌体M13的基因间隔区(内含有M13的复制起点)插入到细菌质粒载体中构建而成的质粒。噬菌粒在大肠杆菌细胞内以质粒的复制起点进行复制,产生双链DNA。当含噬菌粒的大肠杆菌被辅助噬菌体感染后,在辅助噬菌体基因产物作用下,噬菌粒基因间隔区特定位点被切开,然后以M13的复制起点进行复制,产生单链DNA,并利用辅助噬菌体提供的装配蛋白和外壳蛋白装配成重组噬菌体颗粒,释放至胞外。噬菌质粒载体本身分子小,约为3kb,便于分离和操作;可克隆10kb的外源DNA片段,克隆能力强于M13噬菌体载体。
【答案解析】