【正确答案】(1)碱裂解法：该法简单、重复性好而且成本低，是使用最广泛的方法。在NaOH存在的强碱性(pH12．0～12．6)条件下，用强阳离子去垢剂SDS破坏细胞壁和裂解细胞，并使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA发生变性，释放出质粒DNA。尽管碱溶液能破坏核酸的碱基配对，但CCC质粒DNA因缠结紧密而不易解链。只要不在碱性条件下变性太久，当pH调至中性时，CCC质粒DNA就可重新恢复其天然状态。细胞被裂解后，细胞壁碎片与变性的蛋白质和染色体DNA形成大的复合物，这些复合物在高钾盐条件下可有效沉淀，而质粒DNA保留于上清中。通过无水乙醇沉淀上清中的质粒DNA，并用70％的乙醇洗涤，如此制备的核酸其纯度可满足DNA测序与PCR等实验的要求。碱裂解法是一种适用范围很广的方法，能从所有的大肠埃希菌菌株中分离出质粒DNA，制备量可大可小。(2)煮沸裂解法：煮沸裂解法是将细菌悬浮于含TritonX-100和溶菌酶的缓冲液中，TfimnX一100和溶菌酶能破坏细胞壁，再用沸水浴裂解细胞，使宿主细胞的蛋白质与染色体DNA变性。由于CCC质粒DNA因结构紧密不会解链，当温度下降后，CCC质粒DNA可重新恢复其超螺旋结构。通过离心去除变性的蛋白质和染色体DNA，然后回收上清中的质粒DNA。煮沸裂解法是一种条件比较剧烈的方法，只能用于小质粒DNA(<15kb)的小量与大量制备，适用于大多数大肠埃希菌菌株。由于糖类很难去除。而且糖会抑制限制性酶和聚合酶的活性，所以本方法不适用于在去污剂、溶菌酶在加热情况下可释放大量糖类的大肠埃希菌菌株，如HBl01及其衍生菌株(TGI)。另外，煮沸不能完全灭活核酸内切酶A(endonucleaseA，endA)的活性，因此本方法不适用于表达endA的菌株。(3)SDS裂解法：>15kb的质粒DNA容易因细胞裂解和后继操作而遭到破坏，因此需要温和的裂解方法。SDS裂解法是将细菌悬浮于等渗的蔗糖溶液中，用溶菌酶和EDTA处理，以破坏细胞壁，再用SDS裂解去壁细菌，从而温和地释放质粒DNA到等渗液中，然后用酚／氯仿抽提。由于条件温和，SDS裂解法有利于大质粒DNA的提取，但有一部分质粒DNA会与细胞碎片缠结在一起而丢失，故产率不高。(4)其他方法：如小量一步提取法和牙签少量制备法等，各有特点与适用范围。小量一步提取法是直接将酚／氯仿与细菌培养物混合，同时完成细胞裂解与蛋白质变性两个过程，然后离心去除大部分胞核DNA与蛋白质，最后从上清中回收质粒DNA。本方法简单快速、实验成本