问答题 根据对细菌限制和修复系统的知识,设计一个简单的实验来检测你收集的菌株是否有原噬菌体的存在。
【正确答案】一旦溶原性噬菌体整合入宿主的基因组中,即构成原噬菌体(prophage)。在没有与宿主基因组一起复制之前,原噬菌体DNA可通过甲基化状态与宿主DNA区别开来。但一旦进行复制,原噬菌体DNA容易受到宿主特异性DNA修饰系统的修饰,因此难以与宿主基因组区分开来。噬菌体可在特异性位点(att)与非特异性位点整合到宿主DNA中,使修复系统不能起作用。通过Southern RFLP分析可以识别出整合到宿主基因组的原噬菌体。快速鉴定的方法要将溶原体(整合有原噬菌体的细菌)暴露在诸如紫外线等环境压力下,促使原噬菌体进入裂解状态。这就是“噬菌斑诱导分析”(plaque induction assay)的原理。
【答案解析】