问答题 已知一酶需要高浓度的镁离子来表现活性。如果没有Mg2+,酶蛋白会不可逆地变性。为了找到纯化该酶的方案,你试用了离子交换柱和琼脂糖层析。两种情况下酶都失活了。为什么会这样?依据你的解释,如何改进?
【正确答案】如果离子结合得太紧,需要高浓度的离子。离子交换柱会去除这些离子。在琼脂糖层析中,离子移动比蛋白移动慢得多,从而被分开。解决这个问题的措施是试用该离子平衡的凝胶柱层析,并且洗脱液中离子浓度与之相等。
【答案解析】