问答题 植物种子活力的快速测定方法有哪些?主要原理是什么?试列出主要实验步骤。
【正确答案】常用的方法主要有TTC法和染料染色法。 TTC法:TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲[*](TTF)。应用TTC的水溶液浸泡种子,使之渗入种胚的细胞内,如果种胚具有生命力,其中的脱氢酶就可以将TTC作为受氢体还原成为三苯甲[*]而呈红色,如果种胚死亡便不能染色,种胚生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色,因此,可以根据种胚染色的部位或染色的深浅程度来鉴定种子的生命力。实验步骤:①将种子用温水(约30℃)浸泡2~6h,使种子充分吸胀。②随机取种子100粒,水稻种子要去壳,豆类种子要去皮,然后沿种胚中央准确切开,取其一半备用。③将准备好的种子浸于TTC试剂(0.12%~0.5%,TTC可直接溶于水,溶于水后呈中性,pH(7±0.5),不宜久藏,应随用随配)中,于恒温箱(30~35℃)中保温30min。④染色结束后要立即进行鉴定,因放久会褪色。倒出TTC溶液,再用清水将种子冲洗1次或2次,观察种胚被染色的情况。凡种胚全部或大部分被染成红色的即为具有生命力的种子;种胚不被染色的为死种子,如果种胚中非关键性部位(如子叶的一部分)被染色,而胚根或胚芽的尖端不染色都属于不能正常发芽的种子。 染料染色法:有生命力的种子胚细胞原生质膜具有半透性,有选择吸收外界物质的能力,一般染料(如0.02%~0.2%靛红溶液或5%红墨水)不能进入细胞内,胚部不染色。而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可自由进入细胞内使胚部染色。所以,可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。实验步骤同TTC法,只是上述步骤③中的时间应缩短至5~10min。
【答案解析】