【正确答案】 | | pH2.5 | pH3.5 | pH6 | pH8 | pH11.4 |
| UMP | 负电荷最多 | -1 | -1.5 | -2 | -3 |
| GMP | 负电荷较多 | -0.95 | -1.5 | -2 | -3 |
| AMP | 负电荷较少 | -0.46 | -1.5 | -2 | -2 |
| CMP | 带正电荷 | -0.16 | -1.5 | -2 | -2 |
(1)电泳分离四种核苷酸时应取pH3.5,在该pH时,这四种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP。
(2)应取pH8.0,这样可使各核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂。虽然pH11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对树脂不利。
(3)洗脱液的pH应取pH2.5。当不考虑树脂的非极性吸附时洗脱顺序为CMP>AMP>GMP>UMP(根据pH2.5时核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度),但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP>AMP>UMP>GMP。