问答题 蛋白质凝胶过滤和蛋白超滤是一回事吗?请给予解释。
【正确答案】不是。 凝胶过滤不是一般意义上的过滤,而是一种分子筛柱层析。凝胶过滤(gel filtration chromatography)是根据蛋白质分子大小用凝胶作为介质分离蛋白质的一种柱层析方法。比凝胶网孔大的分子被排阻在凝胶颗粒外,而最先流出柱外;比网孔小的分子能不同程度地自由出入凝胶颗粒的内外,洗脱路径长,因而得到分离。此法常用于分子大小差别大的蛋白质的分离,也可用于对球状蛋白质的天然分子质量鉴定。 超滤(ultrafiltration)则是将蛋白质溶液装入一种用半透膜制成的过滤器中,通过加压、抽真空或离心,使水溶液透过半透膜,而蛋白质得到浓缩。超滤常用于蛋白质溶液的浓缩。
【答案解析】回答该问题时,在阐述凝胶过滤基本原理的同时,应该明确指出(1)硫酸铵是小分子无机化合物,容易深度进入凝胶网孔;(2)蛋白质被排阻在网孔外,先于硫酸铵被洗脱。除盐最常见的方法还有“透析”。用“超滤法”一般不能直接除去蛋白质溶液中的盐,其更适用于蛋白质浓缩。