基因治疗比较难于推广应用的主要原因是载体。简述病毒载体和非病毒载体的优缺点并比较二者的优缺点。
 
【正确答案】(1)病毒载体 病毒载体介导的基因转移效率较高。用于基因治疗的病毒载体分为逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺病毒伴随病毒载体以及疱疹病毒载体等。 ①优点 a.病毒载体转化效率高、宿主范围广,并且易于分离制备; b.逆转录病毒前病毒通过LTR高效整合至靶细胞基因组中,有利于外源基因在靶细胞中的永久表达; C.逆转录病毒结构基因gag、env和pol的缺失不影响其他部分的活性; d.无病毒基因的病毒载体安全性好; e.单纯疱疹病毒载体在体外可达到很高的滴度,以作为病毒贮备。 ②缺点 a.逆转录病毒载体随机整合,存在插入突变、激活癌基因的危险; b.腺病毒载体可能产生复制型腺病毒且靶向性差; C.宿主的免疫反应可能导致腺病毒载体表达短暂; d.病毒载体免疫原性高、会引起机体免疫排斥; e.病毒载体毒性大、目的基因容量小; f.制备较复杂、费用较高等。 (2)非病毒载体 非病毒载体包括裸DNA、脂质体载体及阳离子多聚物型载体等。 ①优点 a.裸DNA有效运转并表达目的基因; b.脂质体载体使用方便、成本低廉; C.多聚阳离子型载体系统合成比较方便、安全无毒; d.白明胶和聚氨基葡萄糖制成的DNA微球体毒性低、可与活性物质共包装实现靶向运输、储存方便、稳定,同时可以达到可控持续释放,延长基因表达时间; e.非病毒载体不受基因插入片段大小的限制,携带的外源基因很少会整合到宿主基因组中。 ②缺点 a.裸DNA缺乏靶向性,并且只能在局部作用,不能转染大量细胞,使用时局限性较大。 b.脂质体载体易被吞噬细胞系统及靶细胞溶酶体等选择性吞噬、降解。 C.单独使用多聚阳离子,基因转移组织特异性和靶向性差、体内基因转移效率较低。 (3)二者优缺点的比较 ①非病毒载体较病毒载体的毒性和免疫反应低; ②非病毒载体转导效率低,目的基因只能实现瞬间表达,其运送系统的颗粒较大,容易引发免疫反应和被机体所清除。
【答案解析】