结构推理 用pH=7.0的缓冲液从阳离子交换柱上洗脱下列氨基酸时,哪种氨基酸先被洗脱下来?(1)Asp和Lys;(2)Arg和Met;(3)Glu和Val;(4)Gly和Leu;(5)Ser和Ala。
【正确答案】用离子交换树脂分离氨基酸主要根据氨基酸所带的电荷不同,另外还和氨基酸的极性等有关。(1)因为Asp的pI=2.97,Lys的pI=9.74,在pH=7.0时,Asp带负电荷,Lys带正电荷,所以用阳离子交换树脂分离时,Asp不能与树脂结合,先被洗脱下来;(2)Arg的pI=10.76,Met的pI=5.75,在pH=7.0时,Arg带正电荷,Met带负电荷,所以Met先被洗脱下来;(3)Glu的pI=3.22,Val的pI=5.97,在pH=7.0时,Glu和Val都带负电荷,但Glu所带的负电荷要多于Val,所以Glu先被洗脱下来;(4)Gly的pI=5.97,Leu的pI=5.98,在pH=7.0时,Gly和Leu带负电荷的量相近,但由于Leu的非极性较Gly强,Leu与树脂吸附能力较强,所以Gly先被洗脱下来;(5)Set的pI=5.68,Ala的pI=6.02,在pH=7.0时,Ser和Ala都带负电荷,但Ser所带的负电荷稍多于Ala。另外Ser分子中含有的-OH基的极性减弱了与树脂的吸附能力,所以Set先被洗脱下来。
【答案解析】