问答题 Southern blot/Northern blot
【正确答案】Southern blot即DNA印迹,是英国的分子生物学家Southern于1975年发明的一种利用分子杂交原理鉴定DNA的方法。技术要点是:将DNA样品进行限制性内切酶处理,并用琼脂糖凝胶电泳将不同长度的DNA进行分离,然后将DNA变性并原位转移至硝酸纤维素膜,与带有标记的核酸探针(已知序列)进行杂交反应,从而使能与探针互补的DNA片段得到检测。DNA印迹可用来鉴定不同物种间是否存在{{U}}同源基因{{/U}},或鉴定转基因生物是否已有{{U}}外源基因{{/U}}的整合,也可用于鉴定同一生物某一基因的拷贝数。 Northern blot即RNA印迹,基本原理同上。首先将mRNA进行凝胶电泳分离,变性后转移到硝酸纤维素膜上,再利用特异核酸探针进行分子杂交,找出互补的目标核酸分子。注意在RNA印迹中被分析的样品是mRNA。其主要用途是在mRNA水平对某基因的时空表达以及表达量进行分析。
【答案解析】