【正确答案】
【答案解析】细胞内蛋白质浓度不一致的原因可以归纳为这样6个调控水平:①DNA水平不一致,表现为拷贝数不同,序列长度及组成不同,增强子不同等。②转录水平不同,启动子效率不同。③转录后,RNA剪接程及修饰度不同。④成熟mRNA转运到内质网的效率不同。⑤mRNA翻译效率不同。⑥翻译后蛋白加工修饰不同。
4种测定蛋白质浓度方法,如凯氏定氮法、紫外吸收法、双缩脲法、Lowry法、考马斯亮蓝法等。具体原理参考上一题。
分析某一特定蛋白质的含量,要选用ELISA。用待测特定蛋白质的抗体(链接适当的一抗)与待测蛋白质混合液杂交,通过合适的结合一抗的二抗进行显色定量。
附:ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。