【正确答案】(1)Gateway大规模克隆技术的原理 利用λ噬菌体进行位点特异性DNA片段重组，实现不需要传统的酶切连接过程，将基因快速克隆和载体间平行转移。 (2)Gateway大规模克隆技术的基本操作流程 Gateway大规模克隆技术包括TOPO反应和LR反应两步。 ①TOPO反应 将目的基因PCR产物连入Entry载体，载体上的CCCTT被拓扑异构酶识别，切开后通过该酶274位上的酪氨酸与切口处的磷酸基团形成共价键，将酶偶联在载体上。加入PCR产物后，载体上3'突出端GTGG与PCR产物的互补性末端接头序列CACC配对，使PCR产物以正确方向连入Entry载体。 ②LR反应 将目的片段从Entry载体中重组进表达载体。Entry载体上基因两端具有attL1和attL2位点，目的载体上含有attR1和attR2位点，在重组蛋白的作用下发生定向重组，形成新的位点attB1和attB2，将目的基因转移到表达载体中。