问答题 简述新一代测序各平台的优点和缺点及适用领域。
【正确答案】
【答案解析】见下表
新一代测序平台的优缺点及应用
平台 文库/模板准备 测序反应 读长/base 测序时间 测序通量/Gb 优点 缺点 生物学应用
454GS FLX 片段化乳胶PCR 焦磷酸测序 330 0.35 0.45 读长较长利于重复片段测定;测序时间较短 试剂成本高;测定同多聚串错误率高 从头拼装测序;元基因组
Illumina/So lexa"s GA Ⅱ 片段化桥连PCR 可逆末端终止 75或100 4.9 18、35 目前运用最广的平台 样本倍增力低 重测序
SOLiD 3 片段化乳胶PCR 连接测序 50 7、14 30、50 双碱基编码提供内部纠错机制 测序时间长 重测序
HeliScope 片段化单分子 可逆末端终止 32 8 37 测序模板数量上无偏 高错误率 RNA-seq
Pacific
Biosciences
片段化单分子 实时测序 964 N/A N/A 读长最长 高错误率 全长转录组测序