结构推理 设计一套分离细胞核、叶绿体、线粒体的技术路线。
【正确答案】要想分离细胞核、线粒体和叶绿体等细胞器,可采用差速离心的方法将其分离。主要步骤如下:①用低渗匀浆、超声破碎或研磨等方法可使细胞质膜破损,形成细胞核、线粒体、叶绿体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器和细胞组分组成的混合匀浆;②利用不同的离心速度所产生的不同离心力,将各种亚细胞成分分开,先用较低的离心速度将细胞核沉淀下来,将上清液再次用较高的速度离心,以沉淀叶绿体,最后再提高离心速度沉淀线粒体;③分离物的鉴定:细胞核的鉴定,将细胞核沉淀液涂片、卡诺固定液固定、Giemsa染色,镜检可见细胞核呈紫红色,胞质碎片呈浅蓝色;叶绿体可以吸附吖啶橙后可发橘红色的荧光,利用荧光显微镜可以对发荧光的叶绿体进行观察;线粒体的检测,滴片后,向标本上滴加1/%詹纳斯绿B溶液染色,光镜下可以看到线粒体呈蓝绿色,小棒状或哑铃状。
【答案解析】