问答题
将含有天冬氨酸(pI=2.98)、甘氨酸(pI=5.97)、亮氨酸(pI=6.53)和赖氨酸(pI=5.98)的pH3.0柠檬酸缓冲液,加到预先同样缓冲液平衡过的强阳离交换树脂中,随后用缓冲液析脱此柱,并分别收集洗出液,这5种氨基酸将按什么次序洗脱下来?
【正确答案】在pH=3.0左右,氨基酸与阳离子交换树脂之间的静电吸引的大小次序是碱性氨基酸(A2+)>中性氨基酸(A+)>酸}生氨基酸(A0)。因此氨基酸的洗出顺序大体上是酸性氨基酸、中性氨基酸,最后是碱性氨基酸,由于氨基酸和树脂之间还存在疏水相互作用,所以其洗脱顺序为:Asp,Thr,Gly,Leu,Lys。
【答案解析】