【正确答案】实验流程设计如下： (1)提取总RNA ①用液氮研磨材料至成为匀浆，加入Trizol试剂，进一步破碎细胞并溶解细胞成分； ②加入氯仿抽提，离心，分离水相和有机相； ③收集含有RNA的水相，通过异丙醇沉淀，获得比较纯的总RNA。 (2)mRNA的纯化 采用寡(dT)一纤维素柱层析法获得高纯的mRNA。 (3)cDNA的合成 ①以mRNA为模板、oligo(dT)为引物，由反转录酶催化反转录成cDNA。 ②用TdT在cDNA末端加上poly(C)。 ③以加尾的dC-cDNA为模板，用接头引物Adapter dG分别和基因特异性引物进行PCR，扩增基因5'末端。 ④将5'端的扩增片段克隆到pMD18-T载体上，转化大肠杆菌E.coli Top10F感受态细胞。 ⑤筛选出阳性转化子经PCR筛选后测序。