问答题 一个氨基酸混合样品,经过常规纸层析有效分离后,需要用试剂显色出氨基酸位点。请问:(1)常用显色试剂是什么?(2)显色原理是什么?(3)如何设计对照才能使氨基酸得到定性?(4)如果有一个氨基酸点呈黄色,请说出该氨基酸的特征。
【正确答案】(1)水合茚三酮。
(2)在弱酸性条件下,α-氨基酸与水合茚三酮共热,氨基氧化脱氨,羧基发生脱羧反应,生成紫色化合物;脯氨酸为亚氨基酸,显色特殊,为黄色。
(3)用标准氨基酸(已知氨基酸)为对照,在同样条件下进行纸层析分离、显色反应,比较未知样品和对照样品位点的Rf值,则可确定未知氨基酸的种类。
(4)为脯氨酸,属于α-亚氨基酸,没有自由的α-氨基,侧链为杂环结构。
【答案解析】