说说用poly(A)T tract分离mRNA的主要过程。
 
【正确答案】poly(A)T tract分离mRNA是利用mRNA 3'末端含有poly(A)的特点,当RNA流经寡(dT)纤维素柱时,在高盐缓冲液的作用下,mRNA特异性结合在柱上,再用低盐溶液或蒸馏水洗脱mRNA。经过两次寡(dT)纤维素柱后可得到较高纯度的mRNA。主要过程如下: (1)poly AT tract mRNA分离系统将生物素标记的寡(dT)引物与细胞总RNA温育; (2)加入与微磁球相连的抗生物素蛋白以结合poly(A) mRNA; (3)通过磁场吸附作用将poly(A) mRNA从总RNA中分离。
【答案解析】