试述实验鉴定细胞壁、细胞核、淀粉粒、油脂和蛋白质等细胞结构与组分的方法。
 
【正确答案】(1)细胞壁的鉴定方法 利用细胞壁质壁分离实验观察并鉴定细胞壁,实验原理为:当外界溶液浓度大于细胞液浓度时,根据扩散作用原理,水分会由细胞液中渗出到外界溶液中,通过渗透作用失水;由于细胞壁和原生质层的伸缩性不同,细胞壁伸缩性较小,而原生质层较大,从而使二者分开。 (2)细胞核的鉴定方法 由于细胞内各种结构的比重和大小都不相同,可用差速离心法分离细胞器:用低渗匀浆、超声破碎或者研磨等方法使细胞质膜破碎,形成细胞核、线粒体、叶绿体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器和细胞组分的混合匀浆。在密度均一的介质中由低速到高速逐级离心,用于分离不同大小的细胞和细胞器。在差速离心中细胞器沉降顺序依次为:细胞核、线粒体、溶酶体与过氧化物酶体、内质网与高尔基体、最后为核蛋白。利用甲基绿-派洛宁染色液对细胞核染色后可以发现其被染成蓝绿色,核仁和细胞碎片被染成淡红色。 (3)细胞内淀粉粒、油脂和蛋白质的鉴定方法 ①多糖可用PAS反应鉴定。其原理是过碘酸氧化多糖的1,2-乙二醇基形成醛基后,再利用希夫试剂与醛基反应。因为多糖类物质都能产生PAS反应,所以可用不同方式改进其反应特异性。 ②四氧化锇与不饱和脂肪酸反应呈黑色,用以证明油脂的存在。 ③蛋白质成分有多种鉴定方法。在米伦(Millon)反应中,氮汞试剂与组织中蛋白质侧链上的酪氨酸残基反应,形成红色沉淀;在重氮反应中,氢氧化重氮与酪氨酸、色氨酸和组氨酸反应形成有色的复合物;蛋白质中的-SH基可用形成硫醇盐共价键的试剂进行检测等。
【答案解析】