问答题 金氏法测定血清ALP 标准管中酶活性单位的计算。测定管:血清0.1ml 加底物液等后于37℃水浴15min,再加显色液显色。同时,设立除先不加血清、其它步骤相同的空白管(在反应最后加血清),510nm处以空白管调零测出其吸光度△Au。第3 号标准管:取0.05mg/ml 的酚标准液0.6ml,加显色液等至总体积与测定管相等,用蒸馏水替代酚标准液、其它步骤相同的空白管调零,510nm处测出其吸光度△As。规定1 金氏单位:100ml 血清ALP 在37℃与底物作用15min,产生1mg 酚。试求第3 号标准管所代表的酶活性单位数。(5 分)
【正确答案】解:根据样品中酶活性单位数U 的通用公式 u u u u u u V V t t m m t V m t V m U 0 0 0 0 0 0 = ? ? ? ? = 、比尔定律△A=εCl/n、 对比法、样品摩尔浓度 u u u V m C = ,得到设立单一标准管的惯用单位计算公式: u u s s s u V V t t m C V A U A 0 0 0 ? ? ? ? Δ Δ = 查某一管时,△Au=△As,则上式为: u u s s V V t t m C V U 0 0 0 ? ? ? = 0.1 100 15 15 1 0.05 0.6 ? ? ? = =30 即第3 号标准管所代表的酶活性单位数为:30 金氏单位/ 100ml (评分标准:公式3 分、计算过程1 分、计算结果1 分)
【答案解析】