【正确答案】当具有一定分子量分布的高聚物溶液从柱中通过时,较小的分子在柱中停留时间比大分子停留的时间要长,于是样品各组分即按分子大小顺序而分开,最先淋出的是最大的分子。
应用:
一、脱盐:脱盐用的凝胶多为大粒度的,高交联度的凝胶。此时溶液中蛋白质等大分子的Kd=0,盐类的Kd=1。由于交联度大,凝胶颗粒的强度较好,加之凝胶粒度大,柱层操作比较便利,流速也高。
二、分子量测定:对于一个特定体系(凝胶柱),待测定物质的洗脱体积与分子量的关系符合公式
Ve=-KlogM+C
先以3个以上(最好更多些)的已知分子量的标准蛋白过柱,测取各自的Ve值。以Ve作纵坐标,logM作横坐标制作标准曲线。在同一测定系统中测取未知物质的Ve值便可由标准曲线求得分子量。
三、分离纯化:根据分子量不同流出先后顺序不同,收集单一洗脱峰的物质,得以纯化。
【答案解析】