问答题
野生型Tn3和几种突变体Tn3转座到一个质粒上,并进行ApR抗性的筛选。请指出下列突变对转座产生的产物类型及转座频率的影响。假设每种突变至少完全消除一个相关功能,但需要记住某些蛋白质具有双重功能。所用细菌菌株为RecA-,以阻止同源重组的发生。
问答题
解离酶基因的点突变。
【正确答案】解离酶基因发生点突变:如果突变只影响转座酶阻遏物的功能,那么,转座频率会上升,而转座后的产物是一条未改变的染色体和一个带有Tn3元件的质粒;如果突变只影响重组功能,转座频率保持不变,但转座后可能形成共整合体(cointegrate),即质粒整合到染色体中;如果突变影响转座和重组双重功能,转座频率上升,但只形成共整合体。
【答案解析】
问答题
解离酶的启动子突变。
【正确答案】解离酶基因的启动子发生突变,不产生解离酶,因此,转座频率上升,但只形成共整合体,因为转座酶未受到阻遏,而且不会发生共整合体的解离。
【答案解析】
问答题
转座酶基因的点突变。
【正确答案】转座酶基因发生点突变:不论转座子的切除,还是靶DNA的切割功能都受到损伤,所以,不发生转座。其结果是既没有转座产物形成,供体或受体分子也不会存在,因为这些分子仅有一个发生断裂。
【答案解析】
问答题
转座酶的启动子突变。
【正确答案】转座酶基因的启动子突变:无转座酶形成,不发生转座,同时检测不到转座产物或中间产物。
【答案解析】
问答题
bla(β-内酰胺酶)基因的点突变。
【正确答案】bla(β-内酰胺酶)基因发生点突变:对转座或解离可能没有影响,但检测不到转座的发生,因为选择标记已不起作用。
【答案解析】
问答题
解离位点(res)发生突变。
【正确答案】解离位点(res)发生突变:转座频率保持不变,但转座后只形成共整合体,因为解离酶不能识别解离位点(res site)。
【答案解析】