【正确答案】 D

【答案解析】[解析] 蛋白质分离与纯化的方法有透析法、离心法、层析法和电泳法等。利用蛋白质对配体的亲和力进行分离的方法是亲和层析法，这里排除E选项。盐析法是利用溶解度差别的纯化法分离蛋白质，排除A选项。等电聚焦电泳和离子交换层析是根据电荷不同的纯化方法，排除B，C选项。利用凝胶颗粒的多孔网状结构按分子大小分离蛋白质的方法是凝胶过滤层析法，D是正确答案。