问答题 请简述原核生物大肠杆菌DNA复制的延伸过程。
【正确答案】·DNA复制的延伸过程需要DNA聚合酶Ⅲ、引物酶、DNA聚合酶Ⅰ、DNA连接酶、单链DNA结合蛋白(SSB)、解旋酶等。其中DNA聚合酶Ⅲ有10个亚基,其中αθε是核心酶,具有5′→3′聚合活性和3′→5′外切活性,在DNA前导链和后随链的合成中起非常重要的作用;而DNA聚合酶Ⅰ小亚基,具有5′→3′外切活性,主要用于引物的切除,而大亚基具有5′→3′聚合活性和3′→5′切活性,主要负责引物切除后DNA链空缺的合成,该酶在后随链的合成中发挥非常重要的作用;DNA连接酶,在后随链的合成中,连接冈崎片段;引物酶在后随链中不断合成引物起始冈崎片断的合成;解旋酶,在DNA合成过程中不断打开双螺旋;单链DNA结合蛋白(SSB),在双链DNA解链后,与单链DNA结合,使其保持单链状态,适宜作为模板。 ·DNA复制的延伸过程:在解旋酶的作用下,DNA双链打开,单链DNA结合蛋白与单链DNA结合,使其保持单链状态。引物酶与亲代DNA链结合合成引物,DNA聚合酶Ⅲ在引物后合成子代DNA链。3′→5′亲代DNA链为模板链进行的子代DNA合成是连续的,我们称这条子代DNA为前导链,而另外一条亲代DNA模板链是5′→3′,由于DNA聚合酶只能沿5′→3′合成DNA,因此以5′→3′亲代DNA为模板链的DNA合成只能是不连续的,合成的子代DNA链被称作后随链。后随链是由许多冈崎片段在DNA连接酶的作用下连接产生的长链。由于DNA聚合酶只能沿两条亲代DNA链同方向移动,因此前导链正常合成,而后随链在合成过程中不断地形成一个个结,在结的局部位置后随链的合成方与前导链相同。
【答案解析】原核生物大肠杆菌DNA复制的延伸过程包括前导链的合成和后随链的合成。答题要点应该包括合成前导链和后随链所需要的酶及特点;合成过程。