问答题 简述怎样利用化学诱变剂在细菌中的诱变来检测它们的致癌作用。
【正确答案】由于大多数诱变剂同时也是致癌剂,所以许多诱导突变的化合物很有可能致癌。检测化学诱变剂对细菌的作用的最简单最敏感的方法是Ames法。这种检测利用了四种不同的组氨酸依赖型(his-)鼠伤寒(沙门氏)菌株。每个his-都根据不同的碱基置换或移码突变回复为his+。每个菌株对诱变剂的敏感性可以通过两个突变得以提高:一个是增加细胞对外来物质透性的突变,另一个是可防止诱变剂诱导的突变被自然存在的修复系统修复的突变。在一次检测中,108~1010个细菌被铺在基本培养基上,把一片已被诱变剂溶液饱和的圆状滤纸片放在平板中央。2天后,his-的细菌不能生长,而突变成his+的细菌则可以形成小的菌落。如果所要检测的化合物诱导突变,那么至少有一块平板上的滤纸片会被一圈his+菌落包围。致变的效力越大,菌落的数目越多。这样就可以估计自发突变的频率。实际应用中,基本培养基中含有少量的组氨酸(只能供一两轮复制所需,因为一些诱变剂只对复制中的DNA起作用)和小鼠肝脏的提取物(微粒组分),因为许多潜在的致癌剂可被肝脏细胞内羟化酶激活,但细菌中缺乏这样的酶,这也说明实际的诱变或致癌剂通常是被吸收的化学物质的代谢产物,化学物质本身是无害的。这个技术具有广泛的实际价值,因为它可以快速检测诱导点突变的可疑致癌剂。它不仅很灵敏,而且快速经济,只需2~3天。
【答案解析】