【正确答案】①外植体来源：刚展开的幼嫩叶片是常用的原始材料。或者用愈伤组织或悬浮细胞，常年供应，操作方便。 ②酶液的组成和浓度：不同材料、不同供应商的酶应做专门的试验，找出最佳浓度配比。 ③渗透压：在分离过程中考虑一定的渗透压，避免细胞壁去掉后细胞因渗透不平衡而破裂。常用CPW溶液。 ④处理的温度和时间：一般在暗条件下于23-32℃下进行处理。温度高，处理时间短，但获得的原生质体易褐化，破裂。温度低，处理时间长，不超过24小时。