菌在培养过程中菌体数量急剧减少,如何设计实验证明该细菌的培养液中感染了噬菌体?如何筛选抗噬菌体细菌?
证明菌液中是否感染了噬菌体的方法之一:将少量细菌的培养液与大量对噬菌体敏感的细菌混合后,将此混和液与45度左右的琼脂培养基在培养皿中充分混匀,铺平后培养。经数小时至10余小时培育后,观察在平板表面的菌落,若布满敏感细菌菌落的菌苔上长有一个个透亮不长菌的小圆斑,说明细菌的培养液中感染了噬菌体。反之,则可能是其他的原因造成菌体数量急剧减少。
方法之二:将细菌的培养液离心,取菌体沉淀制片,进行电镜观察其中是否含有噬菌体颗粒。将培养至对数期的细菌培养液,用新鲜的培养液稀释成浓度为105/mL的细菌悬液,涂布到预先涂满噬菌体的平板上,保温一定时间后,可以观察到平板上存在没有形成噬菌斑的菌落,即为抗噬菌体的菌落。挑选出该菌落,重新涂布于预先涂满噬菌体的平板上,待长出菌落后,选择生长情况最好的菌落继续在预先涂满噬菌体的平板上进行涂布,由此获得纯的抗噬菌体细菌。