结构推理 T细胞转化试验的原理是什么?如何评价其转化情况?
【正确答案】T细胞转化实验是检测T细胞免疫功能的经典试验,基本原理是采用T细胞敏感的刺激物在体外刺激T细胞,T细胞受到刺激后将发生增殖、转化,根据其增殖转化的功能评定相应的细胞功能。淋巴细胞的转化情况评定有形态法、放射性核素法和MTI"比色法。形态法利用淋巴细胞受刺激物作用后,将出现细胞形态方面的改变,取培养物标本涂片可见原始淋巴细胞、过渡型淋巴母细胞和未转化淋巴细胞,其中前两者计为转化的淋巴细胞,每份标本计数200个细胞,计算淋巴细胞转化率:淋巴细胞转化率=转化淋巴细胞/(转化淋巴细胞+未转化淋巴细胞)×100%正常情况下,健康人外周血经pHA刺激的淋巴细胞转化率为60%~80%,小于50%可视为降低。放射性核素法为在细胞培养的S期加入H'TdR,后者即掺入到新合成的DNA中,其掺入的多少可由细胞内反射性强度表示出来,根据掺入的多少可推测细胞的增殖程度,转化能力通常以刺激指数(SI)表示,SI=pHA刺激管cpm均值/空白对照cpm的均值,一般认为SI应大于MTT比色法,利用MTT在活细胞线粒体琥珀酸脱氢酶作用下被还原为呈蓝色的MTY一甲簪,形成的量与增殖程度呈正相关,通过比色法测OD值,以刺激指数作为判断淋巴细胞转化率的指数。
【答案解析】