问答题 磷酸吡哆醛(PLP)是鸟氨酸氨基转移酶(ornithine aminotransferase)的辅酶。下页图是鸟氨酸氨基转移酶的稳定性(有PLP或无PLP)分析结果图,即将该酶(有PLP或无PLP)分别置37℃温浴一段时间,并监测酶活性的变化情况。问:
问答题 随着温浴时间的延长,酶活性为何降低?
【正确答案】
【答案解析】说明该酶的热稳定性差,酶的高级结构主要依靠氢键等非共价键维持,因此,随着温浴时间延长,酶的空间结构发生改变,酶活性下降。
问答题 缺少PLP的酶活性为什么降低程度更为明显?
【正确答案】
【答案解析】缺少PLP时,酶的空间构象更容易改变,因此酶活性下降更快,同时也表明辅酶不仅和酶的催化活性有关,也和酶活性空间结构的维持有关。
问答题 这些现象提示我们在酶纯化实验中应该注意什么?
【正确答案】
【答案解析】这些现象揭示我们在酶的纯化实验中,要防止由于温度所引起酶的构象改变而导致的酶活性下降,应尽量在低温下纯化酶,此外,适当添加辅酶,有利于保持酶的活性。