问答题
TFIIIA是5s rRNA基因表达所需的转录因子。这个蛋白质含有9个锌指结构域,与5s rRNA基因内的一段序列和5s rRNA本身结合。
【正确答案】分离一个带有5S基因的限制性片段。将两个5'端用多核苷酸激酶带上标记,将其中一个标记的末端用限制性内切核酸酶切割。用纯的TFIIIA结合于DNA上,然后用DNase I处理,在胶上分析切割产物。蛋白质结合的位置就是DNA上没有被消化的区域。记住要有一个不加蛋白质的对照,并且要滴定DNase I的浓度。
【答案解析】
【正确答案】通过点突变确定哪些残基的突变会丧失锌结合能力。
【答案解析】