【正确答案】(1)PCR反应的缓冲液：
   三羟甲基氨基甲烷．盐酸(Tris-HCl)缓冲液
   氯化钾(KCl)促进引物的退火，浓度太高时会抑制Taq DNA聚合酶活性。
   加入BSA或明胶有利于保护Taq DNA聚合酶活性。
   必要时加入适量二甲基亚砜(DMSO)或甲酰胺利于破坏模板二级结构，提高PCR反应特异性。
   (2)镁离子浓度：一般用量1.5～2.0mmoL/L，Taq DNA聚合酶活性需要Mg²⁺。Mg²⁺浓度过低，会显著降低酶活性。Mg²⁺浓度过高又使酶催化非特异性扩增增强。Mg²⁺浓度还会影响引物的退火、模板与PCR产物的解链温度，从而影响扩增片段的产率。
   (3)底物浓度：工作浓度20～200μmol/L，dNTPs浓度过高可加快反应速度，也增加碱基的错配率和实验成本。降低浓度会导致反应速度下降，可提高反应的特异性。在PCR反应中，4种dNTP必须以等摩尔浓度配制，以减少PCR反应的错配误差并提高使用效率。
   (4)Taq DNA聚合酶：75℃～80℃时具有最高的聚合酶活性，150个核苷酸/s；具有良好的热稳定性，95℃仍有活性，应用浓度一般为1～2.5U/100μL反应体积。
   (5)引物0.1～0.5μmol/L：引物浓度偏高会引起错配或非特异性扩增、生成引物二聚体，使目的DNA片段产率下降。退火温度与引物Tm值有关，引物Tm值在55℃～80℃范围较为理想。
   (6)反应温度和循环次数。