（1）实验设计思路
查阅相关资料，确定几个温度，在相同体系下，仅温度是唯一变量，进行酶活性测定（设置几个重复），在最后测定结果中，哪个测试温度下，酶活性最高，则该温度是酶的最适温度。
（2）应遵循的原则
① 酶活性：测定酶活力，就要测定酶促反应速度。
a．酶促反应速度也是用单位时间内底物的消耗量或产物的生成量来表示。与底物相比，产物从无到有，浓度变化大，容易检测，所以多数情况下是测定产物的生成量。
b．要想准确获得酶的催化活力，必须测定酶促反应初速度，即反应初期产物浓度随反应进程成正比例增加时段内的反应速度。
② 酶活性测定原则：最适条件下测定，才能反应酶真实的催化能力。
a．首先反应体系中，底物过量，远远大于酶的量。
b．保证测定反应初速度，以计算酶活性。
c．创造合适的缓冲体系、最适pH，如果酶需要激活剂，也需要加入合适剂量以确保酶促反应处于最适条件。