(1)无菌操作是微生物学研究和应用的基础的原因
因为微生物通常是肉眼看不到的微小生物,而且无处不在。因此,在微生物的研究及应用中,不仅需要通过分离纯化技术从混杂的天然微生物群中分离出特定的微生物,而且还必须随时注意保持微生物纯培养物的“纯洁”,防止其他微生物的混入,所操作的微生物培养物也不应对环境造成污染。所以无菌技术是保证微生物学研究正常进行的关键。
(2)对实验所用到的器具和实验材料进行消毒和灭菌的方法如下:
①高压蒸汽灭菌的方法
在密闭的蒸锅内,其中的蒸汽不能外溢,压力不断上升,使水的沸点不断提高,从而锅内温度也随之增加。在0.1MPa的压力下,锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下,可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢,同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。
②灼烧灭菌的方法
镊子、剪刀、解剖刀等浸入95%的酒精中,使用前取出在酒精灯前灼烧灭菌,灼烧后立即使用。
③高温干热灭菌的方法
干热灭菌是利用烘箱加热到160~180℃的温度来杀死微生物。由于在干热条件下,细菌的营养细胞的抗热性大为提高,接近芽孢的抗热水平,通常采用170℃持续90min来灭菌。
④紫外线灭菌的方法
在接种室、超净台上或接种箱中用紫外灯灭菌。紫外线灭菌是利用辐射因子灭菌,细菌吸收紫外线后,蛋白质和核酸发生结构变化,引起细菌的染色体变异,造成死亡。