【正确答案】GST融合表达的优点是:①GST可以促进目的基因的可溶性表达;②GST与还原型谷胱甘肽(GSH)特异性结合,因此可以用偶联了GSH的琼脂糖凝胶介质进行亲和纯化;③GST具有酶活性,可以利用试剂盒进行检测,从而直接反映融合蛋白的可溶性表达量。 缺点是:GST分子质量较大(26kD),需要在融合蛋白表达纯化后,通过化学试剂或蛋白酶切割去除,以释放并纯化目的蛋白。 His-tag融合表达的优点是:①His-tag由6个组氨酸组成,相对分子质量很小,一般认为不会对融合表达的目的蛋白的结构和功能产生影响,因此不需要在后期切除;②His-tag与多种过渡金属离子如Cu2+、Zn2+、Ni2+、Co2+、Fe3+有较强的亲和作用,因此可以用偶联了Ni2+的琼脂糖凝胶介质进行亲和纯化。 缺点是:His-tag对目的蛋白的可溶性表达并无帮助。
【答案解析】