结构推理 测定酶活性时应注意什么?
【正确答案】测定酶的活性时要求有适宜的特定反应条件,影响酶促反应速度的各种因素应该相对恒定。①酶的样品应做适当的处理。例如测定血浆中乳酸脱氢酶活性时,应去除红细胞,因红细胞中乳酸脱氢酶的活力比血浆中酶活力高150倍。②反应体系中,底物的量要足够,使酶被底物饱和,以充分反映待测酶的活力。但过高的底物浓度可能抑制酶的活性,一般底物浓度在10Km以上。③测定代谢物时应保持酶的足够浓度。④应根据反应时间选择反应的最适温度。⑤根据不同的底物和缓冲溶液选择反应的最适pH值。⑥为获取最高反应速度,在反应体系中应含有适宜的辅助因子、激活剂等。⑦测定酶活性时应测定酶促反应的初速度。
【答案解析】