假设某蛋白质含有10个羧基,平均pK为3.5;2个咪唑基,平均pK为6.0和14个-NH3+,平均pK为10.0。从pH1开始用NaOH滴定,试问达到等电点时应有多少个H+被滴定掉?画出蛋白质的滴定曲线,并标明等电点的位置。
 
【正确答案】(1)因为该蛋白质分子含有10个羧基,2个咪唑基,14个-NH3+共有26个(10+2+14)可解离的质子。蛋白质的pI是指蛋白质分子所带净电荷为零时溶液的pH。当该蛋白质分子中10个羧基的H+,2个咪唑基的H+和4个-NH3+的H+被滴定掉,即有16个质子被滴定掉时蛋白质分子的净电荷为零(如下图所示),这时就到达了该蛋白质的pI。 (2)为了画出蛋白质的滴定曲线,可粗略地计算一下不同pH时每分子蛋白质解离的质子数,如下表所示。 不同pH时每分子蛋白质解离的质子数 以pH作横坐标,每分子蛋白质解离的H+数作纵坐标,作该蛋白质的滴定曲线(如下图所示),从滴定曲线上可看到,当16个质子被滴定掉时溶液的pH约为9.5,这就是该蛋白质的pI。 蛋白质的滴定曲线
【答案解析】