【正确答案】PCR用于扩增代表mRNA转录物某一单位点与其3'或5'末端之间区域的部分cDNA称为快速扩增cDNA末端技术。如果已知目的mRNA的一片段链内短序列,据此或设计基因特异引物,用原先存在的poly(A)尾(3'末端)或附加的同聚尾(5'末端)互补的序列做末端引物,就可以获得从未知末端直到已知区域的部分cDNA序列。为获得3'末端cDNA克隆,mRNA反转录时需用杂合引物(QT)。QT由17个核苷酸长的olig(dT)及特定的35个核苷酸序列(QI-QO)构成,前者被命名为锚定引物。为获得5'末端部分cDNA克隆需用基因特异引物,产生第一链产物,可用末端脱氧核苷酸转移酶及dATP加poly(A)尾。通过QT引物和反转录使用的上游基因特异引物生成第二链cDNA;
【答案解析】